Uporaba kromogene tehnike pri testiranju bakterijskih endotoksinov

Kromogena tehnika je med tremi tehnikami, ki vsebujejo tudi tehniko gel-strdkov in turbidimetrično tehniko za odkrivanje ali kvantificiranje endotoksinov iz po Gramu negativnih bakterij z uporabo lizata amebocitov, ekstrahiranega iz modre krvi podkovnjaka (Limulus polyphemus ali Tachypleus tridentatus).Lahko bi ga razvrstili kot kromogeni test končne točke ali kinetično-kromogeni test, ki temelji na določenem uporabljenem principu testa.

Načelo reakcije je naslednje: amebocitni lizat vsebuje kaskado encimov serin proteaz (proencimov), ki jih lahko aktivirajo bakterijski endotoksini.Endotoksini aktivirajo proencime, da proizvedejo aktivirane encime (imenovane koagulaza), slednja katalizira cepitev brezbarvnega substrata, pri čemer se sprosti rumeno obarvan produkt pNA.Sproščeno pNA je mogoče fotometrično izmeriti pri 405 nm.In absorbanca je v pozitivni korelaciji s koncentracijo endotoksina, potem lahko koncentracijo endotoksina ustrezno kvantificiramo.


Čas objave: 29. septembra 2019